タンパク質発現とは、標的遺伝子を人工ベクターに再現し、レシピエントセルまたは無細胞システムに導入して、異種系でタンパク質を発現する技術を指します。
タンパク質の発現は、天然のタンパク質を得るのが難しいという問題を解決できます。 1970年代の異種タンパク質発現の最初の確立以来、数千の組換えタンパク質が成功裏に発現し、バイオテクノロジーと生物医学研究と産業の継続的な発達を効果的に促進しています。
客観的:
タンパク質の発現を通じて、最初に自然源から得るのが困難なタンパク質を得ることが可能です。
第二に、タンパク質発現産物の大きなバッチと高純度は、標的タンパク質の分析を促進するだけでなく、コストを大幅に削減します。
さらに重要なことに、組換えタンパク質は通常、宿主細胞の高いバイオセーフティを示すために選択されているため、病原性宿主の潜在的なバイオセーフティリスクを回避します。
方法:
主に、遺伝子フラグメント複製のプロセス、発現システムの導入、誘導された発現、製品の浄化、分析が含まれます。
タンパク質発現の概要
分類:
タンパク質発現システムは、通常:に分けることができます。
1。核発現システム:大腸菌は最も一般的なタンパク質発現システムであり、明確な遺伝的背景、便利な繁殖、低コスト、高発現の利点があります。ただし、翻訳修飾メカニズムがなく、グリコシル化やタンパク質発現を修正する特別な選択点切断には適していません。亜種はタンパク質の発現にも使用でき、その利点は強力な代謝発現能力と低プロテアーゼ活性であり、徐々に注目を集めています。
2。真核生物発現系:真核生物タンパク質の自然活性に近い翻訳後、ある程度のグリコシル化を達成できます。主に含まれています。 ineast酵母発現システム(一般的な赤酵母、醸造酵母など)、酵母は高密度のまろやかであり、翻訳後に修正することができ、原核生物および真核生物の宿主細胞の利点があり、優れたタンパク質発現システムでもあります。 dise虫細胞発現システム:外因性遺伝子は、発現のためにバキュロウイルスベクターによって昆虫細胞にトランスフェクトされます。これは、膜タンパク質、高分子タンパク質、プロテインキナーゼ、および原核生物系で発現するのが困難な他のタンパク質に適した真核生物タンパク質の高発現システムです。哺乳類細胞発現システム:哺乳類細胞の翻訳と装飾の効率は、酵母および昆虫細胞系の翻訳効率よりもはるかに高くなっています。哺乳類細胞の構造と機能は天然の真核生物タンパク質に近いが、発現レベルは低く、コストは高い。
3。無細胞発現系:標的タンパク質は粒子とPCR産物から直接発現でき、発現システムは大腸菌、小麦胚、ウサギ網状細胞などからの細胞のない抽出物です。細胞のないタンパク質発現の利点は、他のシステムで発現するのが難しい生成物、高度な発現、および低コストと高度のコストを発現する能力です。
投稿時間:2025-07-01