リムルス試薬トリペプチド/エンドトキシン基質の動作原理と調製

リムルス試薬トリペプチドは、カブトガニ血球溶解液から抽出、または人工合成した特定の配列を有するトリペプチド物質です。リムルス試薬トリペプチドは、グラム陰性菌の成分を検出および測定するための定量分析 (細菌エンドトキシン検査など) に使用される発色基質です。—エンドトキシン。エンドトキシンによって活性化された酵素の作用を受けると、着色化合物（p-ニトロアニリンなど）が放出され、色の強度を測定してエンドトキシン含有量と相関付けることができます。

動作原理

エンドトキシンの活性化: エンドトキシンの存在下では、カブトガニの血液中のアメーバ細胞が酵素を放出し、それによって凝固カスケードが引き起こされます。

酵素の作用: 活性化された酵素 (通常は凝固酵素) が発色基質に作用します。

発色反応: 酵素は基質を切断し、p-ニトロアニリン (pNA) と呼ばれる黄色の化合物を放出します。

定量分析: 黄色の強度はサンプル内のエンドトキシン含有量に比例し、通常は分光光度計を使用して 405 nm の吸光度で測定されます。

準備方法

リムルス試薬トリペプチドは、調製に関して 2 つのアプローチを通じて取得できます。

1. カブトガニの血球から天然成分を抽出し、分離・精製して活性型トリペプチドを取得します。

2. 固相合成技術を用いて特定のアミノ酸配列を順番につなぎ、トリペプチドの構造を精密に制御します。

リムルスの保護政策（浙江省、福建省、広東省、広西チワン族自治区などの省はリムルスを「省の重点保護水生野生動物」に指定しており、香港は2012年末に底引き網漁を禁止する条例を発行した）のため、また抽出プロセスが複雑で困難であるため、最初の方法のコストは比較的高くなっています。したがって、現在では固相合成が一般的に使用されています。特定のアミノ酸配列を連続的に連結することで、トリペプチドの構造を精密に制御することができる。この方法は、製品の安定性と一貫性を確保するだけでなく、大規模な生産も可能にし、試薬の検査に対する製薬業界のニーズを満たします。