高精度機器として、HPLCは、使用中に正しい方法で動作しない場合、厄介な小さな問題に簡単につながる可能性があります。最も一般的な問題の1つは、列圧縮の問題です。故障したクロマトグラフをすばやくトラブルシューティングする方法。 HPLCシステムは、主に貯水池ボトル、ポンプ、インジェクター、列、列温度チャンバー、検出器、データ処理システムで構成されています。システム全体の場合、柱、ポンプ、検出器は、問題になりやすい主要なコンポーネントであり、主要な場所です。
カラム圧力の鍵は、HPLCを使用するときに細心の注意を払う必要がある領域です。カラム圧力の安定性は、クロマトグラフィーピーク形状、カラム効率、分離効率、保持時間に密接に関連しています。カラム圧力の安定性は、圧力値が安定した値で安定していることを意味するのではなく、圧力変動範囲が345kpaまたは50psiの間であることを意味します(カラム圧力が安定してゆっくりと変化する場合、勾配溶出の使用を可能にします)。圧力が高すぎるか低すぎるかは、カラム圧力の問題です。
HPLCの障害とソリューションが最も生息しやすい
1、高圧はHPLCの使用において最も一般的な問題です。これは、圧力が突然上昇することを意味します。一般に、次の理由があります。(1)一般に、これはフローチャネルの閉塞によるものです。この時点で、私たちはそれを区分的に調べる必要があります。 a。まず、真空ポンプの入口を切り取ります。この時点で、ピークチューブに液体が満たされていたため、ピークチューブが溶媒ボトルよりも小さくなり、液体が自由に滴下しているかどうかを確認しました。液体がゆっくりと滴下していない場合、溶媒フィルターヘッドがブロックされます。治療:30%硝酸に30分間浸し、超純水ですすぎます。液体がランダムに滴下する場合、溶媒フィルターヘッドは正常で、チェックされています。 b。移動相がカラムを通過しないようにパージバルブを開き、圧力が大幅に低下しない場合、フィルターホワイトヘッドがブロックされます。治療:ろ過されたホワイトヘッドを除去し、10%イソプロパノールで30分間超音波処理しました。圧力が100psiを下回ると仮定すると、ろ過された白い頭は正常であり、チェックされています。 c。圧力が低下しない場合、列がブロックされない場合、列の出口端を取り外します。治療:それが緩衝塩閉塞の場合は、圧力が正常になるまで95%すすいです。閉塞がいくつかの高度に保存された材料によって引き起こされる場合、現在の移動相よりも強い流れを使用して通常の圧力に向かって急ぐ必要があります。上記の方法に応じて長期の洗浄圧が低下しない場合、列の入口と出口は、それどころか機器に接続されていると見なすことができ、列は移動相でクリーニングできます。現時点では、カラムの圧力がまだ低下していない場合、柱の入口シーブプレートを交換することしかできませんが、操作が良くないと、カラム効果の低下につながるのは簡単です。困難な問題については、列の交換を考慮することができます。
(2)誤った流量設定:正しい流量をリセットできます。
(3)誤った流れ比:フローの割合の異なる粘度指数は異なり、粘度が高いフローの対応するシステム圧力も大きくなります。可能であれば、低い粘度溶媒を交換または再セットして準備できます。
(4)システム圧力ゼロドリフト:液体レベルセンサーのゼロを調整します。
2、圧力が低すぎる(1)は通常、システムの漏れによって引き起こされます。対処方法:各接続、特に列の両端にあるインターフェイスを見つけ、リーク領域を締めます。投稿を取り外し、PTFEフィルムを適切な力で締めたり並べたりします。
(2)ガスはポンプに入りますが、圧力は通常、この時点で高くて低い状態で不安定です。さらに真剣に、ポンプは液体を吸収することができません。処理方法:洗浄バルブを開き、3〜5ml/minの流量できれいにします。そうでない場合、専用の針チューブを使用して、排気バルブで気泡を吸引しました。
(3)移動相流流:貯水池ボトルに移動相があるかどうか、シンクが移動相に浸されているかどうか、ポンプが走っているかどうかを確認します。
(4)参照バルブは閉じられていません。参照バルブは減速後に閉じられます。通常、0.1に下がります。参照バルブを閉じた後、約0.2ml/ min。
まとめ:
この論文では、液体クロマトグラフィーの一般的な問題のみを分析します。もちろん、私たちの実際のアプリケーションでは、他のより多くの問題に遭遇します。障害処理では、次の原則に従う必要があります。仮想因子と問題の関係を決定するために、一度に1つの要因を変更するだけです。一般的に、トラブルシューティングのために部品を交換する場合、無駄な部品を取り戻すために、解体された無傷の部品を元に戻すことに注意する必要があります。良い記録的な習慣を形成することは、断層処理の成功の鍵です。結論として、HPLCを使用する場合は、前処理と機器の適切な操作とメンテナンスに注意を払うことが重要です。
投稿時間:2025-07-02